干货系列:m6A RNA甲基化研究的数据挖掘思路

日期:23-05-04

大家好,这里是专注表观组学十余年,领跑多组学科研服务的易基因。


关于m6A甲基化研究思路

1)整体把握m6A甲基化图谱特征:m6A peak数量变化、m6A修饰基因数量变化、单个基因m6A peak数量分析、m6A peak在基因元件上的分布、m6A peakmotif分析、m6A peak修饰基因的功能分析

2)筛选具体差异m6A peak和基因:差异m6A peak鉴定、非时序数据的分析策略、时序数据的分析策略、差异m6A修饰基因的功能分析、差异m6A修饰基因的PPI分析、候选基因的m6A修饰可视化展示

3m6A甲基化组学&转录组学关联分析:Meta genes整体关联、DMG-DEG对应关联、m6A修饰目标基因的筛选策略

4)进一步验证或后期试验

PSm6Am1Am7GIP测序法的数据挖掘思路类似

 

一、m6A甲基化图谱分析

1m6A peak数量、m6A修饰基因数量的比较


肌肉发育不同阶段m6A总数和修饰的基因总数的变化




不同组中检测到的m6A peak总数和m6A修饰基因总数的重叠分析



2)基因上m6A peak平均数量分析


基因的m6A peak数量分布与差异比较


 

3m6A peak在各基因元件上的分布

l  不同基因组元件(5UTRCDS3UTR)的m6A甲基化水平分布规律不同。

l  特别是在不同物种中,基因元件的甲基化水平可能自身的特点。




一般主要分布在CDS区和3UTR



(4) m6A peakmotif分析

跟物种有关:

动物和酵母主要是RRACHR = G or AH = A,C, or U

拟南芥和番茄主要是UGUAYYY = A, G, U, or C


鸡脂肪组织

 


番茄果实


5m6A修饰基因的鉴定和功能分析



m6A修饰基因占所有基因的比例



m6A修饰基因的组间重叠分析





m6A修饰基因的功能分析


二、差异m6A peak分析

  1. 1)非时间序列数据:




  1. 2)时间序列数据:












  1. 三、组学关联分析:m6A甲基化组学&转录组学



转录水平 vs. peak富集程度





转录水平 vs. peak数量变化




转录水平倍数变化 vs. peak倍数变化




n  重叠分析

 



n  九象限图

四、进一步验证或后期试验

关于m6A RNA甲基化研究进一步验证或后期试验的下游实验设计详细内容,敬请关注下期推送!



 

关于易基因RNA m6A甲基化测序(MeRIP-seq)技术

易基因MeRIP-seq技术利用m6A特异性抗体富集发生m6A修饰的RNA片段(包括mRNAlncRNArRNA去除所有RNA),结合高通量测序,可以对RNA上的m6A修饰进行定位与定量,总RNA起始量可降低至10μg,最低仅需1μgRNA。广泛应用于组织发育、干细胞自我更新和分化、热休克或DNA损伤应答、癌症发生与发展、药物应答等研究领域;可应用于动物、植物、细胞及组织的m6A检测。

大样本量m6A-QTL性状关联分析,传统MeRIP单个样品价格高,通常难以承担。易基因开发建立MeRIP-seq2技术,显著提成IP平行性,实现不同样本间相对定量,降低检测成本。

易基因提供适用于不同科研需求的MeRIP技术:

技术优势:

研究方向:

m6A甲基化目前主要运用在分子机制的理论性研究

环境暴露与响应:污染、抗逆、生活方式

 

易基因科技提供全面的RNA甲基化研究整体解决方案,技术详情了解请致电易基因0755-28317900



相关阅读:

干货分享:DNA甲基化研究的测序数据挖掘思路

 

独家分享:高通量测序后的下游实验验证方法——DNA甲基化篇

 

干货:m6A RNA甲基化MeRIP-seq测序分析实验全流程解析

 

项目文章 |  90天见刊,易基因m6A RNA甲基化(MeRIP)+转录组组学研究