宏基因组测序
由于扩增子测序技术关注的是目标基因的若干区域,因此其分辨率有限,一般认为较为准确的分类水平到属级别。虽然扩增子测序也可以通过数据库映射预测群落可能的功能网络,但是微生物遗传片段交流比较频繁,功能基因的横向转移也较为普遍,依托于有限菌株建立的功能映射无法尽可能的还原群落的真实功能网络。全宏基因组测序技术直接对提取的全宏基因组DNA建立随机小片段文库,能够获取更多的序列信息。通过组装、ORFs预测与注释,可以大大提高分类水平部分至菌株级别,并通过各种大型公共数据库进行相应功能注释,尽可能真实的获取群落功能网络信息。高精度的分析结果也使相关动物验证实验更加具备可行性。
技术优势
- 超深度视野:提取的全宏基因组DNA建立随机小片段文库,避免了目的片段的PCR过程,降低bias,随机测序,获取更丰富的序列信息;
- 更精确分类定位 :最大限度地获取全宏基因组序列信息,通过组装延伸,可精确定位部分序列至分类学菌株水平;
- 真实可靠的功能分析:不再是依托映射数据库进行功能预测,而是通过测得的功能基因序列尽可能真实还原构建微生态系统的功能网络。
实验策略
信息分析
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案例研究
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微生物组学|全宏基因组测序技术