真核转录组-mRNA+lncRNA测序(lncRNA -seq)
原核转录组测序可以从基因表达量、基因结构和sRNA调控功能三维度揭示不同生物性状的分子调控机制。如通过计算各组间的差异基因并对差异基因进行富集分析,获得对生物性状影响较大的通路信息;通过预测基因的反义转录本,丰富基因组注释内容;研究sRNA对mRNA的相互作用,从分子调控角度解释生物性状之间的差异。
易基因针对检测原核菌个性化设计rRNA去除探针,利用高通量技术对原核细胞所产生的所有mRNA和sRNA(非编码RNA)进行测序。系统全面解析特定细胞所产生的mRNA和sRNA对生物性状的影响。
技术优势
1. 针对原核生物设计去除rRNA专属探针,rRNA去除效果好。
2。 同时分析sRNA与mRNA的互作关系,更加全面解读表达互作网络。
研究方向
原核转录组测序是专业针对原核微生物设计开展的转录组学研究。
Ø 基因表达量分析
Ø 差异基因鉴定
Ø 非编码RNA鉴定等
实验策略
信息分析
技术参数
研究案例
嗜水气单胞菌的原核转录组研究
Dong Y,et al.IolR, a negative regulator of the myo-inositol metabolic pathway, inhibits cell autoaggregation and biofilm formation by downregulating RpmA in Aeromonas hydrophila. NPJ Biofilms Microbiomes. 2020 May 20;6(1):22.
1.背景:
嗜水气单胞菌是鱼类运动性气单胞菌败血症的病原体。嗜水气单胞菌的发病机制是复杂的、多因素的,涉及粘附素、毒素和铁元素摄取系统等多种毒力因子。尽管不断有新的毒力因子被人们发现,但这种细菌的致病机制仍不清楚。
2.方法:
IolR是一种转录抑制因子,可以负向调节肌醇代谢活性。作者在养殖死亡的鲤鱼中分离出来嗜水气单胞菌NJ-35细菌,采用同源重组的方法构建了一株IolR基因缺失菌株,将ΔiolR突变体菌株与野生型菌株进行比较分析。对细菌在LB培养基上的生长情况进行评估,并进行转录组比较分析和qRT-PCR验证,以鉴定IolR在嗜水气单胞菌NJ-35中的功能。
3.结论:
本研究证实IolR通过下调嗜水气单胞菌RpmA的表达来抑制细胞的自聚集和生物膜形成,从而进一步减少与钙的接触机会,进而抑制凝集形成和生物膜的形成所需的细胞-细胞相互作用。这项研究对IolR在嗜水气单胞菌中的作用提供了理论基础,并为寻找治疗这种细菌感染的药物靶点提供了新的线索。
原核转录组分析表明差异表达基因大多涉及膜部分、转运、细胞代谢和信号转导等功能
参考文献:
Dong Y,et al.IolR, a negative regulator of the myo-inositol metabolic pathway, inhibits cell autoaggregation and biofilm formation by downregulating RpmA in Aeromonas hydrophila. NPJ Biofilms Microbiomes. 2020 May 20;6(1):22.
AraC-Type Regulator Rsp Adapts Staphylococcus aureus Gene Expression to Acute Infection
AraC型转录因子Rsp使金黄色葡萄球菌基因表达适应急性感染
1、背景:
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种重要的人类病原体,可引起急性感染和慢性感染。而急性感染
的特征在于有明显的毒素产生,慢性感染则通常涉及生物膜形成。然而,金黄色葡萄球菌引起急性
和慢性感染的机制仍然不明确。
2、方法:
作者鉴定了一种调节蛋白Rsp,该调节蛋白属于AraC型转录调节因子家族的成员。当抑制主要的菌膜相关基因的
表达及菌膜形成时,Rsp可促进毒素的产生。
3、结论:
Rsp通过上调Agr及下调polysaccharide intercellularadhesin (PIA)来调节毒力影响。深入研究表明,Rsp通过结合 agrP2
和icaADBC启动子,来促进Agr调控的PSMs 和α-toxin的表达,同时抑制PIA的产生。该研究表明Rsp调控子可作为
治疗金黄色葡萄球菌急性感染的一个潜在靶标。
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转录组学|原核转录组测序